精品一区二区三区四区人妻69-中文字幕日韩中文字幕在线精品-亚洲一区二区三区午夜激情视频-国产小视频在线观看网站

藥物誘導(dǎo)基因敲除實驗（如他mo昔芬系統(tǒng)或四環(huán)素系統(tǒng)）是在靶基因兩側(cè)插入特定重組酶識別位點后，通過給藥定時激活Cre-ER或Tet-On/Tet-Off等重組酶，實現(xiàn)特定器官、特定時間點的高效基因刪除，兼顧全身敲除的che底性與條件性敲除的時空精度，是研究基因功能和藥物靶點驗證的利器。

條件性基因敲除實驗借助Cre/loxP或Flp/FRT系統(tǒng)，只在特定細(xì)胞類型或發(fā)育階段通過組織特異性啟動子驅(qū)動重組酶切除被loxP/FRT環(huán)繞的目標(biāo)基因，從而規(guī)避胚胎致死、實現(xiàn)精準(zhǔn)時空敲除，是解析基因功能與疾病機(jī)制的核心遺傳學(xué)工具。

RNA干擾實驗（RNA interference, RNAi）是一種由雙鏈RNA（dsRNA）介導(dǎo)的轉(zhuǎn)錄后基因沉默現(xiàn)象，通過特異性降解目標(biāo)mRNA實現(xiàn)基因表達(dá)調(diào)控。

DNA片段的克隆需要合適的載體，載體或是質(zhì)粒，或是噬菌體，或是病毒，通常大多經(jīng)過人工改造。作為載體必須具備兩條件：一是該載體在細(xì)胞內(nèi)必須能自主復(fù)制，即必須具備復(fù)制原點；二是該載體必須具備適合的酶切位點，且這些酶切位點不在復(fù)制原點區(qū)域內(nèi)。以上兩條，保證了載體的可繁殖性和可利用性。為了便于獲得陽隆克隆，載體上常有篩選標(biāo)記，如對抗菌素的抗性，某些基因產(chǎn)物的顯色反應(yīng)等。

DNA甲基化通常抑制基因表達(dá)，去甲基化則誘導(dǎo)了基因的重新活化和表達(dá)。這種DNA修飾方式在不改變基因序列前提下實現(xiàn)對基因表達(dá)的調(diào)控。

慢病毒（Lentivirus）載體是以HIV-1（人類免疫缺陷I型病毒）為基礎(chǔ)發(fā)展起來的病毒載體。對分裂細(xì)胞和非分裂細(xì)胞均具有感染能力，可以將外源基因有效地整合到宿主染色體上，從而達(dá)到持久性表達(dá)。在體外實驗及體內(nèi)實驗的研究中，慢病毒己經(jīng)成為表達(dá)外源基因或外源shRNA的常用載體形式之一， 并且正在獲得越來越廣泛的應(yīng)用。

生物信息學(xué)（Bioinformatics）是在生命科學(xué)的研究中，利用應(yīng)用數(shù)學(xué)、信息學(xué)、統(tǒng)計學(xué)和計算機(jī)科學(xué)為工具對生物信息進(jìn)行儲存、檢索和分析的科學(xué)。

通過非病毒方法將核酸引入真核細(xì)胞的過程定義為轉(zhuǎn)染。使用各種化學(xué)，脂質(zhì)或物理方法，該基因轉(zhuǎn)移技術(shù)是在細(xì)胞背景下研究基因功能和蛋白質(zhì)表達(dá)的有力工具。將外源物質(zhì)導(dǎo)入細(xì)胞的方法主要包括脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染（瞬時轉(zhuǎn)染和穩(wěn)定轉(zhuǎn)染），電轉(zhuǎn)或者病毒感染。病毒載體是進(jìn)行真核細(xì)胞基因工程、真核基因轉(zhuǎn)染的有力工具。